西安交通大学分析测试中心电镜生物样品制备实验室于近日完成实验室硬件建设和人员配备，具备常温透射电镜生物样品超薄切片、正负染色，以及冷冻生物样品高压冷冻、冷冻替代、悬浊液样品制备等技术能力。
为满足校内师生的测试需求，即日起至9月30日，面向校内用户开放常温透射生物样品制备、高压冷冻/冷冻替代样品制备试运行。试运行期间可接收动植物组织及细胞样品，前100个样品仅收取试剂耗材成本费。欢迎校内师生预约！
一、技术介绍
透射电子显微镜常温生物样品制备技术主要包括超薄切片技术、染色技术等。超薄切片技术是生物电镜技术中最基本、应用最多的样品制备技术，包括样品的取材、固定、浸洗、脱水、渗透、包埋、切片、染色和电镜观察等步骤。超薄切片染色技术能够利用重金属盐的高分子密度与组织细胞内的微细结构发生不同程度的结合，提高样品切片细节之间的电子散射强弱对比。
高压冷冻是利用高压（约2045bar，1bar=100kPa）来降低水的冰点，改变水的粘度，抑制冰晶成核和控制冰晶生长速率，减缓冰晶成团形成，从而能够顺利转移样品的热量，在不导致结冰情况下固定较厚的含水样品，使水稳定在玻璃态，从而减少对细胞和组织的损伤。冷冻替代是与冷冻固定结合最紧密的一种脱水和再固定方法，利用有机溶剂作为替代剂（脱水剂），在低温下替代细胞中的水分。
图1透射电镜常温生物样品制备流程图
二、样品适用范围
常温透射生物样品制备：动物组织（心、肝、脾、肺、肾、肌肉等）、细胞；
高压冷冻/冷冻替代：含水份较大的植物组织（叶片、花）。
三、送样要求
1.将组织样品完全浸透在固定液中，4℃条件下固定2小时以上。
2.在低温条件下尽快送样，防止样品冻住。
3.现场填写样品送检单，详细阐述观察需求（细胞器类型、细胞形态变化、方向性、定位等）
四、取材要求
1.新鲜（材料离体后1min内进入固定液，避免细胞自溶和结构变化）
2.体积小（厚度<1mm，长度宽度均<3mm，固定液渗透能力有限，组织太大会导致无法固定充分）
3.机械损伤小（动作轻巧，器械锋利，避免对组织的挤压和推拉）
4.低温操作时，器械、容器、固定液均需预冷（降低酶活性，减少组织自溶）
5.取材部位准确，且注意材料的方向性和定位
①肠、血管、皮肤、肌肉等有方向性的样品需切成1mm×3mm的长方体小块，要观察的面为横切面，放入1.5ml离心管并加满固定液；
②一般组织切成1mm3大小，取3-5个组织，放入1.5ml离心管并加满固定液；
③细胞样品：将样品收集到1.5ml离心管（尖底）并加满固定液。培养细胞的量一般在106个，经离心后肉眼可见细胞团快即可，约米粒大小，收集完毕后缓慢加入固定液，勿冲散细胞，固定至少两小时后送样。
五、温馨提示
所有用户需至少提前1周联系工程师沟通样品详细信息及样品准备方案，并按需提前准备样品。
试运行期间每个课题组限3个样品，超出限额将按正常收费标准收取样品制备费用。
六、应用方向示例
图2动、植物组织电镜拍摄结果
七、联系方式
工程师：禹洁
电话：18706809291
邮箱：2027609685@qq.com
咨询送样：创新港18号楼辅楼三层18-3005
